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分光光度法在优化抽芽黑小麦富集γ-氨基丁酸培育组分中的利用

更新时候:2021-08-10       点击次数:929

黑小麦含有大批人体所需的养分物资和微量元素,是首要的玄色谷物资本[1]。黑小麦中γ-氨基丁酸(GABA)具备增进影象力、降压、改良脑活气、减缓焦炙和头痛等功效[2]。GABA在高档动物中的分解首要来自GABA歧路和多胺降解路子,起主导感化的酶为谷氨酸脱羧酶和二胺氧化酶[3]。L-谷氨酸是谷氨酸脱羧酶的一个底物,能够激起谷氨酸脱羧酶的活性,从而使GABA获得富集[4]。谷氨酸脱羧酶能以磷酸吡哆醛为辅酶专注性催化L-谷氨酸脱羧分解GABA。若能外源插手磷酸吡哆醛,一次进步谷氨酸脱羧酶的活气,能够会使黑小麦中GABA含量有所晋升。谷氨酸脱羧酶是一种Ca2+/钙调卵白依靠性酶,Ca2+浓度与谷氨酸脱羧酶活性有关[5-7];NaCl与动物体内抗逆机制有关,在盐窘境前提下会增进GABA发生。以氯化钙、氯化钠别离做培育液,使黑小麦处于盐勒迫情况中,能够会使黑小麦中GABA含量进步,以完成GABA富集。同时有研讨标明,酸性电解水可增进谷物抽芽进程中某些生物活性物资的堆集。用微酸性电解水处置黑小麦,能够会在杀菌消毒、GABA含量富集方面阐扬主动感化。

本文尝试以运黑161为资料,接纳微酸性电解水浸泡处置,将谷氨酸钠、磷酸吡哆醛、氯化钙、氯化钠4种培育组分列为考查身分,做一系列单身分尝试,肯定考查身分对黑小麦GABA的影响,以便为黑小麦功效性产物开辟供给实际撑持。

 

一、资料与方式

1、资料

运黑161、GABA规范品

2、仪器与装备

bet356体育娱乐官网 、恒温培育箱、真空冷冻枯燥机、UV-9000Sbest365官网登录入口


二、尝试局部

1、黑小麦芽的制备

遴选子粒饱满、无蠹虫、无霉烂的“运黑161",别离称取25.0±0.01g该黑小麦种子于100ml烧杯中。用便宜微酸性电解水(pH5.55、有用氯浓度22.4mg/L)对种子浸泡消毒1h。用呼应培育液以料液比1:2对种子浸泡8h,将浸泡后的种子平均平铺在底部有孔的抽芽盒中,于恒温箱(20℃)停止避光培育。培育时代天天用呼应培育液淋浇3次,对比组用等量去离子水淋浇,培育5天后停止采收。

2、培育液成份对黑小麦芽GABA含量的影响

2.1培育液制备

设置装备摆设品质浓度别离为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mg/mL谷氨酸钠溶液,浓度别离为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mmol/L氯化钙溶液,浓度别离为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mmol/L磷酸吡哆醛溶液,浓度别离为5、50、100、150、200、250mmol/L氯化钠溶液。采收后的黑小麦芽速冻后于真空冷冻枯燥机中停止冻干,磨成粉状后于4℃冰箱储存备用。

2.2规范曲线成立

设置装备摆设差别浓度的GABA规范溶液,各取1ml,别离插手0.60ml 0.20mol/L硼酸盐缓冲液,摇匀后插手2mL5%苯酚溶液,摇匀,插手1mL7%次氯酸钠溶液混匀,用滚水加热5min,直到溶液变为蓝绿色,将其放入碎冰中冷却至室温。用紫外beat365中国在线体育 在645nm处测定吸光度并绘制规范曲线。

2.3样品GABA含量的测定

精确称取0.50g黑小麦芽粉样品,加5mL蒸馏水,在来去振荡器震动提取4h,下层清液于10000r/min离心3min。用移液枪取1mL下层清液于10mL容量瓶中,按测定规范品的方式在光度计波长645nm处测定样品中GABA含量。

 

三、尝试成果

1、谷氨酸钠浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

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 图1 谷氨酸钠浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

 

2、氯化钙浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

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 图2 氯化钙浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

 

3、磷酸吡哆醛浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

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 图3 磷酸吡哆醛浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

 

4、氯化钠浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响

 

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图4 氯化钠浓度对抽芽黑小麦GABA含量的影响


四、论断

尝试以“运黑161"为质料,经微酸性电解水浸泡处置,将谷氨酸钠、磷酸吡哆醛、氯化钙、氯化钠溶液作为抽芽黑小麦富集GABA培育液。用分光光度法测得的尝试成果标明,增添底物浓度,激起谷氨酸脱羧酶活气,使黑小麦抽芽处于盐勒迫情况等方式进步黑小麦芽GABA含量。

 

 

参考文献:

[1] 刘瑞, 于章龙, 孙元琳, 等. 运黑161与运黑14207小麦粉加工特征研讨[J]. 中国粮油学报, 2020, 35(5): 18-22.

[2]朱云辉, 郭元新. 呼应面法优化盐勒迫抽芽苦荞富集γ-氨基丁酸的培育前提[J]. 食物迷信, 2015, 36(19): 96-100.

[3]XING S G, JUN Y B, HAU Z W, et al. Higher accumulation of gamma-aminobutyric acid induced by salt stress through stimulating the activity of diamine oxidases in Glycine max (L) Merr roots[J]. Plant Physiology & Biochemistry, 2007, 45(8): 560-566.

[4]曾晴, 谢菲, 尹京苑, 等. 大豆抽芽富集γ-氨基丁酸的培育液组分优化及盐勒迫下的富集机理[J]. 食物迷信, 2017,38(12): 96-103.

[5]朱云辉, 郭元新. 呼应面法优化抽芽苦荞富集γ-氨基丁酸的培育前提[J]. 东南农林科技大学学报 (天然迷信版),2016, 44(11): 141-148.

[6]郭元新, 杨润强, 陈惠, 等. 盐勒迫富集抽芽大豆γ-氨基丁酸的工艺优化[J]. 食物迷信, 2012, 33(10): 1-5.

[7]张亮, 静恩岳, 孙宇, 等. NaCl勒迫结合Ca2+调控糙米抽芽富集GABA的工艺优化[J]. 食物研讨与开辟, 2018,39(21): 7-14.

 

 

文章内容来历于:陈雅芝,罗鑫,姚芙蓉,等.抽芽黑小麦富集γ-氨基丁酸的培育组分优化[J].食物产业,2021,42(6):114-118.


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