1.概述
　　
　　人们在实际中早已总结出差别色彩的物资具备差别的物理和化学性子。按照物资的这些特色可对它停止有效的阐发和辨别。因为色彩本就引人注重，按照物资的色彩深浅程度来对物资的含量停止估量，可追溯到现代及中世纪。1852年，比尔（Beer）参考了布给尔（Bouguer）1729年和朗伯（Lambert）在1760年所颁发的文章，提出了分光光度的根基定律，即液层厚度相称时，色彩的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠基了分光光度法的实际根本，这便是的比尔朗伯定律。1854年，杜包斯克（Duboscq）和奈斯勒（Nessler）等人将此实际操纵于定量阐发化学范畴，并且设想了*台比色计。到1918年，美国国度规范局制成了*台best365官网登录入口 。尔后，best365官网登录入口 经不时改良，又显现主动记实、主动打印、数字显现、微机节制等各类范例的仪器，使光度法的活络度和精确度也不时进步，其操纵规模也不时扩展。
　　
　　紫外可见分光光度法从问世以来，在操纵方面有了很大的成长，出格是在相干学科成长的根本上，促使beat365中国在线体育 仪器的不时立异，功效加倍齐备，使得光度法的操纵更拓宽了规模。今朝，分光光度法已为工农业各个局部和迷信研讨的各个范畴所普遍接纳，成为人们处置出产和科研的无力测试手腕。我国在阐发化学范畴有着坚固的根本，在分光光度阐发方式和仪器的制作方面上都已到达必然的程度［1］［2］
　　
　　2.道理
　　
　　物资的接收光谱实质上便是物资中的份子和原子接收了入射光中的某些特定波长的光能量，响应地发生了份子振动能级跃迁和电子能级跃迁的成果。因为各类物资具备各自差别的份子、原子和差别的份子空间布局，其接收光能量的情况也就不会不异，是以，每种物资就有其*的、牢固的接收光谱曲线，可按照接收光谱上的某些特色波长处的吸光度的凹凸辨别或测定该物资的含量，这便是分光光度定性和定量阐发的根本。分光光度阐发便是按照物资的接收光谱研讨物资的成份、布局和物资间彼此感化的有效手腕。
　　
　　紫外可见分光光度法的定量阐发根本是朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律。即物资在必然浓度的吸光度与它的接收介质的厚度呈反比，其数学表现式以下：
　　
　　A=錬c
　　
　　式中：A—吸光度（又称光密度、消光值），
　　
　　?—摩尔吸光系数（其物理意思为：当吸光物资浓度为1摩尔/升，接收池厚为1厘米，以必然波长原光经由过程时，所引发的吸光值A），b—接收介质的厚度（厘米），c—吸光物资的浓度（摩尔/升）。
　　
　　物资的色彩和它的电子布局有紧密亲密的干系，当辐射（光子）引发电子跃迁使份子（或离子）从基态回升到激起态时，份子（或离子）就会在可见区或紫外显现吸光，色彩的发生或变更是和份子的普通电子布局的变形的。当份子中含有一个或更多的生色基因（即具备不饱和键的原子基团），辐射就会引发份子中电子能量的转变。罕见的生色团有：
　　
　　CO，-N=N-，-N=O，-CN，CS
　　
　　若是两个生色团之间隔一个碳原子，则构成共轭基团，会使接收带移向较长的波长处（即红移），且接收带的强度较着增添。当份子中含有助色基团（有未共用电子对的基团）时，也会发生红移效应。罕见的助色基团有：-OH-NH2，-SH，-Cl,-Br,-I
　　
　　3.特色
　　
　　分光光度法对阐发职员来讲，能够说是zui有效的东西之一。几近每个阐发尝试室都离不开best365官网登录入口 。分光光度法的首要特色为：
　　
　　（1）操纵普遍
　　
　　因为各类百般的无机物和无机物在紫外可见区都有接收，是以都可借此法加以测定。到今朝为止，几近化学元素周期表上的一切元素（除多数喷射性元素和惰性元素以外）都可接纳此法。在上颁发的有关阐发的论文总数中，光度法约占28%，我国约占所颁发论文总数的33%。
　　
　　（2）活络度高
　　
　　因为新的显色剂的大批分解，并在操纵研讨方面获得了可喜的停顿，使得对元素测定的活络度有所推动，出格是有关多元络合物和各类外表活性剂的操纵研讨，使很多元素的摩尔吸光系数由本来的几万进步到数十万。
　　
　　（3）挑选性好
　　
　　今朝已有些元素只需操纵节制恰当的显色前提便可直接停止光度法测定，如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定，已有比拟对劲的方式了。
　　
　　（4）精确度高
　　
　　对普通的分光光度法，其浓度丈量的绝对偏差在1～3%规模内，如接纳示差分光光度法停止丈量，则偏差可削减到0.X%。
　　
　　（5）合用浓度规模广
　　
　　可从常量（1%～50%）（出格利用示差法）到痕量（10-8～10-6%）（经预富集后）。
　　
　　（6）阐发本钱低、操纵简洁、疾速
　　
　　因为分光光度法具备以上长处，是以今朝仍普遍地操纵于化工、冶金、地质、医学、食物、制药等局部及情况监测系统。单在水质阐发中的操纵就很广，今朝能有直接法和直接法测定的金属和非金属元素就有70多种。
　　
　　4操纵
　　
　　4.1检定物资
　　
　　按照接收光谱图上的一些特色接收，出格是zui大接收波长雖ax和摩尔接收系数澹是检定物资的经常使用物理参数。这在药物阐发上就有着很普遍的操纵。在国际外的药典中，已将浩繁的药物紫外接收光谱的zui大接收波长和接收系数载入此中，为药物阐发供给了很好的手腕。
　　
　　4.2与规范物及规范图谱对比
　　
　　将阐发样品和规范样品以不异浓度配制在统一溶剂中，在统一前提下别离测定紫外可见接收光谱。若二者是统一物资，则二者的光谱图应*分歧。若是不标样，也能够和现成的规范谱图对比停止比拟。这类方式请求仪器精确，紧密度高，且测定前提要不异。
　　
　　4.3比拟zui大接收波长接收系数的分歧性
　　
　　因为紫外接收光谱只含有2～3个较宽的接收带，而紫外光谱首要是份子内的发色团在紫外区发生的接收，与份子和别的局部干系不大。具备不异发色团的差别份子布局，在较大份子中不影响发色团的紫外接收光谱，差别的份子布局有能够有不异的紫外接收光谱，但它们的接收系数是有差别的。若是阐发样品和规范样品的接收波长不异，接收系数也不异，则能够为阐发样品与规范样品为统一物资。
　　
　　例1己二烯-1，5（CH2=CHCH2CH2=CH2）的zui大接收波长雖ax为178nm（摩尔接收系数为26000），而己烯-1（CH2=CHCH2CH2CH2CH3）的zui大接收波长为雖ax为177nm（摩尔接收系数逦11800）。此两个物资有不异的发色团，雖ax值根基不异，但值差别，二烯的逯当鹊ハ┑拇蟆Ｕ馑得饔邢嗤牡舜瞬还查畹姆⑸牛湮詹ǔそ咏于单个发色团的值，但逯翟蛩嫦嗤⑸攀康脑黾佣黾印Ｈ绻屑父龇⑸疟舜斯查，则接收长向红挪动。象丁二烯-1，3（CH2=CHCH=CH2）与己二烯-1，5（CH2=CHCH2CH2CH=CH2）比拟，一样有两个双键，但丁二烯-1，3中为共轭系统，它的zui大接收长雖ax为210nm，而摩尔接收系数逯翟蛴爰憾-1，5根基一样。
　　
　　4.4纯度查验
　　
　　例2紫外接收光谱能测定化合物中含有微量的具备紫外接收的杂质。若是化合物的紫外可见光区不较着的接收峰，而它的杂质在紫外区内有较强的接收峰，就能够检测出化合物中的杂质。