玛卡是原产南美洲安第斯山脉的一种十字花科动物。叶子椭圆，根茎形似小圆萝卜，可食用，是一种自然食物，养分成份丰硕，有“南佳丽参"之誉。玛卡多糖是玛卡中提取的首要活性成份，其具备延缓朽迈、降血糖、进步免疫力、抗病毒及抗癌等感化。玛卡多糖的提取有超声提取和加热回流提取方式，今朝有报道称加热回流提取不如超声提取效力高，且超声提取操纵简略、便利、疾速，且合适产业化出产[1]。本文操纵分光光度法接纳呼应面设想阐发，肯定玛卡多糖的最好提取工艺，以便为玛咖多糖的开辟操纵供给实际根据。
1 资料与方式
1.1 试剂
玛卡（采自云南）；葡萄糖对比品；硫酸、苯酚、乙醇等试剂均为阐发纯
1.2 仪器
UV-9000S型best365官网登录入口 （上海元析仪器无限公司）
1.3 方式
1.3.1 样 品 前 处 理 样 品
打粉，过40目筛，取300.00 g 玛咖粉末于圆底烧瓶，插手适当的75%乙醇溶液，加热回流2h，弃提取液，撤除脂溶性成份，残渣挥干溶剂后备用。
1.3.2 提取
紧密称取样品粉末2.00 g 于三角烧瓶中，插手必然量的去离子水，停止超声提取并抽滤，滤液定容待用。
1.3.3 绘制规范曲线
参考文献［2］，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制规范曲线。同时方程为：A=28.94C+0.07，相干系数 r=0.993，在 0.0047~ 0.0268mg/mL线性杰出。
1.3.4 玛咖多糖含量测定
取适当提取液，以苯酚-硫酸法测定吸光度代入规范曲线方程中，得其多糖的品质浓度。
1.3.5 单身分尝试
称取玛咖粉末2.00 g，考查超声时候（20、30、40、50、60 min）、液料比（20∶1、30∶1、40∶1、50∶1、60∶1）、温度（30、40、50、60、70 ℃）对玛咖多糖提取率的影响。
1.3.6 呼应面设想
考查超声时候、液料比、温度3个身分作为呼应因变量，操纵Design-expert 8.0.6 软件，根据 Box-Behnken中间组合尝试设想道理，以玛咖提取液中多糖得率为呼应值，经由过程呼应曲面阐发停止尝试前提的优化，呼应面设想身分与程度如表 1所示。
表1 呼应面设想身分与程度
程度 | 超声时候（A）/min | 料液比（B）（V：m） | 温度（C）/℃ |
-1 | 20 | 30 | 50 |
0 | 30 | 40 | 60 |
1 | 40 | 50 | 70 |
2 成果阐发
2.1 单身分尝试
2.1.1 超声时候对多糖得率的影响
当液料比为40∶1、温度为 60 ℃，超声时候在20~30 min 内，多糖得率如图1所示。
图1 超声时候对多糖提取的影响
2.1.2 料液比对多糖得率的影响
当超声时候为30 min、温度为60℃，液料比在20∶1~40∶1时，多糖得率如图2所示。
图2 料液比对多糖得率的影响
2.1.3 温度对多糖得率的影响
当超声时候为30min、液料比为 40∶1，温度在 30~60 ℃时，多糖得率如图3所示。
图3 温度对多糖得率的影响
2.2 呼应面设想成果
Box-Behnken 呼应面尝试成果见表2，方差阐发见表3。颠末 Design-expert 8.0.6软件多元回归拟合，获得玛卡多糖的展望模子方程：Y=39.32+2.63A+ 2.78B+10.21C-0.26
AB+1.23AC-0.54BC-2.48A2-4.30B2+1.23C2，此中，Y为玛卡多糖含量，A为超声时候，B为液料比，C为温度。
表2 Box-Behnken 呼应面尝试身分程度及成果
从表3能够看出，温度的“Prob＞F"值小于0.01，标明其对玛卡多糖得率的影响极明显，液料比和超声时候的“Prob＞F"值小于0.05，标明其影响明显，全体模子的“Prob＞F"值小于0.01，标明该二次方程模子高度明显。
表3 回归方程方差阐发
注：“*"差别不明显（P＞0.05）；“**"差别明显（P＜0.05）；“***"差别极明显（P＜0.01）
呼应面图形是呼应值对各身分（A、B、C）所组成的三维空间曲面图，从图4至图6可看出，各身分交互感化对呼应值的影响，温度的影响最为明显，表现为曲线较陡，温度的最好值在60 ℃；而超声时候和液料比次之，表现为曲线较为光滑，其最好呼应值别离为40 min和40∶1。
图4 提取时候和液料比对多糖得率的呼应面和等高线
图5 提取时候和温度对多糖得率的呼应面和等高线
图6 料液比和温度对多糖得率的呼应面和等高线
3 尝试论断
本文以超声时候、液料比、温度为考查身分，接纳Box-Behnken呼应面法，成立了玛卡多糖提取的二次多项式数学模子，经明显性查验阐发，可操纵该模子展望玛卡多糖的得率。优化后的最好工艺为：超声时候40 min、液料比40∶1、温度60 ℃，在此工艺下多糖得率为51.21%，该法为玛卡多糖的进一步开辟操纵和产业化出产奠基了根本。
参考文献：
[1] 薛峰，李春娜，李朋收，等. 超声提取在中药化学成份提取中的利用［J］. 中国尝试丹方学杂志，2014，20（18）：231-234.
[2] 王彩步，段宝忠. 云南差别莳植基地滇黄精中多糖含量测定阐发［J］. 大理学院学报（综合版），2018，3（2）：14-17.
文章内容来历于：黄贻杰，张海珠. Box-Behnken呼应面法优化玛卡多糖提取工艺[J].湖北农业迷信，2021，60（12）：124-127.
