小球藻是绿藻门小球藻科的单细胞绿藻，含有多糖、卵白质、维生素、食用纤维及多种矿物元素。有研讨显现[1-2]，其首要成份多糖的体外抗氧化感化较好，可加强机体免疫力。Okada等[3]指出该多糖减缓机体委靡的活性较乳糖有较着性差异，是以被大批用于保健食物的研讨开辟。紫果西番莲是西番莲科多年木质藤本动物的果实，气息芬香浓烈，富含多糖、无机酸、维生素、氨基酸等养分物资。

本文操纵紫果西番莲按捺小球藻异味，研制小球藻紫果西番莲多糖合适饮料为相干活动食物的开辟供给参考。

一、资料

1、资料与仪器

资料：安康雄性小鼠、小球藻粉、紫果西番莲、蔗糖、泰西参口服液、葡糖糖规范品、苯酚、硫酸、柠檬酸、羧甲基纤维素钠、蒸馏水

仪器：电子天平、超声波细胞破坏机、pH计、X5型best365官网登录入口 （上海元析仪器无限公司）、均质机、离心计心情等

二、方式

1、操纵

1.1、小球藻多糖提取

以蒸馏水为提取溶剂，小球藻粉以1:20品德体积比于100W超声破裂，97℃热水浸提3h后在8000r/min下离心10min，取上清液，插手4%  (Cl3CCOOH)，4℃静置留宿离心，取上清液插手95%乙醇，4℃静置留宿离心取积淀，冷冻枯燥[4]。

1.2、紫果西番莲多糖提取

以蒸馏水作提取溶剂，紫果西番莲果肉以1:5品德体积比，于330W超声波破裂，70℃热水浸提30min后离心，滤液冷冻枯燥[5]。

1.3、分配

50%小球藻多糖水溶液和50%紫果西番莲多糖水溶液以牢固比例夹杂后，插手必然剂量食物增加剂分配。

1.4、均质、灌装与灭菌

分配后的料液均质搅拌2次后灌装于121℃灭菌10min，冷却即得小球藻紫果西番莲多糖复合饮料[6]。

2、复合饮料配方优化

2.1、单身分尝试设想

根据预尝试成果，考查小球藻与紫果西番莲多糖溶液体积比、蔗糖用量、柠檬酸用量、羧甲基纤维素钠用量对饮料的感官评分和离心沉降率的影响，计划以下：

1）蔗糖用量3%、柠檬酸用量0.2%、羧甲基纤维素钠0.3%，考查小球藻与紫果西番莲多糖溶液体积比（3:1、2:1、1:1、1:2、1:3）的影响。

2）小球藻与紫果西番莲多糖溶液体积比1:2、柠檬酸用量0.2%、羧甲基纤维素钠用量0.3%、考查蔗糖用量（1%、3%、5%、7%、9%）的影响。

3）小球藻与紫果西番莲多糖溶液体积比1:2、蔗糖用量3%、羧甲基纤维素钠用量0.3%、考查柠檬酸用量（0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%）的影响。

4）小球藻与紫果西番莲多糖溶液体积比1:2、蔗糖用量3%、柠檬酸用量0.3%、考查羧甲基纤维素钠用量（0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%）的影响。

2.2、呼应面尝试设想

在单身分尝试根本上，以两种物资多糖溶液体积比（A）、蔗糖（B）、柠檬酸（C）和羧甲基纤维素钠（D）的用量为呼应身分，感官得分为呼应值（Y），设想四身分三程度呼应面尝试，操纵Design-Expert 软件的 Box-Behnken 尝试设想道理，优化各组分配比，尝试身分程度见表 1 所示。

表1 呼应面尝试身分程度

3、饮料感官品德评估

3.1、感官评估规范

参考相干饮料评估规范[7-8]，并连系小球藻紫果西番莲多糖复合饮料特征，拟定该饮料的感官评估规范，见下表所示，同时约请10位食物专营职员，根据该规范对差别组分配比制得的饮料停止感官评估，终究评分取均匀值。

表2 饮料感官评估规范

3.2、离心积淀率

称取饮料m0，置于离心管中，以3000r/min离心10min后，对罐内上清液称重记为m，公式W（%）=（m0-m）/m0计较饮料的离心积淀率W（%），平行测定六次[9]。

4、理化目标检测

4.1、 pH值测定 操纵pH计检测复合饮料的pH值。

4.2、多糖含量测定

葡萄糖对比品经120℃枯燥恒重后，根据文献操纵步骤[10] ，别离插手苯酚与浓硫酸预处置样品后，于490 nm波长测定吸光度值，另作空缺对比，随后以对比品溶液的品德浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制规范曲线，获得规范曲线回归方程：y=1.026 x+0.052 （r=0.9989），另于不异波长下测定该复合饮料的吸光度值，根据规范曲线回归方程，计较其多糖含量。

4.3、微生物目标检测

根据国度规范操纵步骤[11]，别离检测小球藻紫果西番莲多糖复合饮料的微生物菌落总数、大肠杆菌和致病菌。

三、成果与阐发

1、单身分尝试成果

1.1、小球藻与紫果西番莲多糖溶液体积比对饮料品德影响

1.2、蔗糖品德对饮料品德的影响

1.3、柠檬酸用量对饮料品德的影响

1.4、羧甲基纤维素钠对饮料品德的影响

2、呼应面优化尝试

2.1、尝试成果

表3 呼应面尝试成果

根据 Box-Behnken 设想道理，别离以小球藻与紫果西番莲的多糖溶液体积比（A）、蔗糖（B）、柠檬酸（C）及羧甲基纤维素钠（D）用量为呼应面考查身分，感官评分为（Y）为呼应值，停止四身分三程度呼应面阐发，成果见表 3 所示。

多元回归拟合模子成果为Y=84.97+2.64A+0.78B+1.20C+0.23D+0.14AB−0.56AC+0.45AD−0.082BC−0.22BD−0.22CD− 0.40A2 −0.73B2 −0.79C2 −0.16D2 ，对该模子停止较着查验与方差阐发，成果如表4.

表4 呼应面方差阐发

2.2、 呼应曲面阐发与考证尝试

从图中得悉，两两身分交互呼应面坡面峻峭挨次为：AC＞AD＞CD＞BD＞AB＞BC。，另对二次多项回归拟合方程停止极值阐发，肯定小球藻紫果西番莲多糖复合饮料的最好配方为：小球藻与紫果西番莲的多糖溶液体积比 1:2、蔗糖 2.35%、柠檬酸0.14%、羧甲基纤维素钠 0.4%，最高展望值为 87.94分，根据2.3.1步骤评估，现实得分为（88.71±0.87）分，标明该回归模子可较好展望复合饮料的最好配方。

图5 两身分交互感化的呼应面

3.3 复合饮料的品德目标成果

接纳上述最好配方制得的复合饮料呈浅黄绿色、光彩均一，紫果西番莲香味浓烈，酸甜适中，室温静置 6 个月未有较着积淀与分层。该复合饮料的pH值为5.7；离心积淀率为0.59%；多糖含量为5.62%；微生物菌落总数≤100 CFU/100mL，未有大肠杆菌和别的致病菌检出。

四、论断

本研讨以小球藻和紫果西番莲多糖为质料，辅以蔗糖、羧甲基纤维素钠研制小球藻紫果西番莲多糖复合饮料。经由过程单身分与呼应面尝试优化获得饮料的最好配方为：小球藻与紫果西番莲的多糖溶液体积比 1:2、蔗糖 2.35%、柠檬酸 0.14%、羧甲基纤维素钠 0.4%，感官评分为（88.71±0.87）分，制得饮料呈浅黄绿色、光彩均一，紫果西番莲香味浓烈，酸甜适中，静置后未有较着积淀与分层。

参考文献：

［1］Marti-Quijal Francisco J, Zamuz S, Tomašević I, et al. A chemometric approach to evaluate the impact of pulses, Chlorella and Spirulina on proximate composition, amino acid, and physicochemical properties of turkey burgers[J]. J Sci Food Agric，2019，99（7）：3672−3680.

［2］魏文志, 夏文水, 吴玉娟. 小球藻糖卵白的分手纯化与抗氧化活性评估[J]. 食物与机器，2006，22（5）：20−22.

［3］Okada H, Yoshida N, Kakuma T, et al. Effect of chlorella ingestion on oxidative stress and fatigue symptoms in healthy men[J]. The Kurume Medical Journal，2018，64：83−90.

［4］史瑞琴, 李大伟, 梁悄悄, 等. 小球藻多糖口服液的制备及其抗氧化活性[J]. 食物产业，2019，40（11）：82−87.

［5］Yuan T Z, Kao C L, Li W J, et al. Chemical constituents of leaves of Passiflora edulis[J]. Chem Nat Compd，2017，53（6）：1−2.

［6］童观珍, 樊莹润, 李泽林, 等. 呼应面设想优化丽江海棠果果汁饮料配方[J]. 食物研讨与开辟，2019，40（24）：85−91.

［7］李翔, 徐宏, 邓杰, 等. 呼应面法优化银耳山查红枣速溶饮料的加工工艺[J]. 食物产业，2020，41（1）：87−91.

［8］刘雪梅, 杨铭, 于德伟, 等. 参精活动保健饮料对活动性委靡大鼠的影响[J]. 食物科技，2018，43（11）：123−126.

［9］郑佳. 牛磺酸薄荷复合活动饮料研制及其体外抗氧化活性[J]. 食物产业科技，2019，40（23）：157−162.

［10］刘芬, 朱顺妮, 徐忠斌, 等. 超声帮助热水浸提小球藻多糖及抗氧化活性测定[J]. 中国酿造，2020，39（2）：177−181.

［11］中华国民共和国品德监视查验检疫总局. GB10789- 2015 饮料公例 [S]. 北京: 中国规范出书社, 2015.

本文章内容来历于：李奕. 小球藻紫果西番莲多糖复合饮料颜料研制及其对小鼠活动耐力的影响[J].食物产业科技，2021,42（10）：314-320.