关头词
beat365中国在线体育 ;裂褶菌;胞内多糖;发酵;酚红祛痰法;祛痰成果
裂褶菌别名白参、树花等,附属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、裂褶菌科、裂褶菌属,是一种食药兼用菌[1]。其散布普遍,在官方被普遍用于医治小儿冷汗、妇女白带增添、神经虚弱、头昏耳鸣等症[2]。裂褶菌多糖是指从裂褶菌籽实体、菌丝体和发酵液中提取出来的水溶性多糖,是裂褶菌中最首要的生物活性物资之一,具备抗肿瘤、抗菌、抗辐射、进步机体免疫力等多种药理活性。由单一组分的β-(1-3)-D葡聚糖构成,此中每3个葡萄糖份子上连有1个β-(1-6)的分支[3-5]。经研讨标明,裂褶菌发酵多糖具备很好的抗炎感化。是以,猜测裂褶菌发酵多糖具备祛痰的潜伏功效,本研讨停止了考证性研讨。
1、资料与方式
1.1尝试资料
供试菌株:裂褶菌菌种由四川省绵阳市食用菌研讨所供给
尝试植物:昆明种小鼠,雌性,体重(20±2)g,6周龄,由长春高新医学尝试植物中间供给,及格证号为10-5113
仪器:电子天平(梅特勒AL104)、UV-5100型best365官网登录入口 (上海元析仪器无限公司)
试剂:阳性药川贝枇杷糖浆,江西三九药业无限公司,批号100305J;苯酚红、碳酸氢钠、氢氧化钠为国产阐发纯
1.2尝试方式
1.2.1裂褶菌液体发酵培育
将配制好的综合培育基分装入容量为250mL的三角瓶内,每瓶装液量为100mL,121℃、20min灭菌、冷却至室温备用。在超净任务台上,每瓶接种直径为6mm的菌饼5~7片。接种后静置培育12h后置于26℃、120r/min摇床上培育7d[6],而后转入装有400mL综合培育基的1000mL三角瓶中,置于26℃、120r/min摇床上培育7d,发酵竣事后,抽滤分手菌丝体及发酵液,菌丝体60℃烘干至恒重,备用。
1.2.2 裂褶菌胞内多糖的提取与纯化
搜集的菌丝体按液料比1∶5在室温前提下用蒸馏水超声提取1次,每次30min,超声频次70Hz,而后置于80℃的恒温水浴锅中浸提5次,浸提的时候别离为5、4、3、2、1h。归并水提液,插手0.5%的活性炭吸附20min,过滤脱碳,减压稀释,用3倍体积的95%乙醇停止积淀,于4℃冰箱中静置留宿。将取得的红色纤维状积淀,复溶,用3倍体积的95%乙醇再积淀,反复3次,搜集积淀,再用无水乙醇洗濯3次,直至析出液中无复原糖反映为止。于60℃前提下烘干,得裂褶菌胞内多糖[7]。
1.3模子与数据阐发
1.3.1祛痰植物模子的成立
取昆明种小鼠50只,随机分为5组,即空缺对比组、阳性药对比组(20mL/kg)、裂褶菌发酵胞内多糖高剂量(500 mg/kg)、裂褶菌发酵胞内多糖中剂量(250 mg/kg)、裂褶菌发酵胞内多糖低剂量(125 mg/kg),每组10只。各组小鼠按体重灌胃给药(20mL/kg),天天1次,持续给药5d,此中空缺对比组给等体积心理盐水。尝试前各组小鼠禁食16h。末次给药后1h后,由腹腔打针5%酚红溶液0.2mL/10g,打针后30min脱颈椎正法小鼠,仰位牢固于手术板上,剪开颈正中皮肤,分手气管四周构造,剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管。放入盛有3mL心理盐水的试管中,再插手5%碳酸氢钠溶液0.1 mL,负气管段中的酚红*开释,用UV-5100型best365官网登录入口 测波长在546nm规模内的OD值,用酚红绘制规范曲线,按照曲线计较酚红含量[8-10]。
1.3.2统计学处置。
利用SPSS12.0软件停止统计学处置,阐发组间差别,尝试成果用(x±s)表现。
2、成果与阐发
裂褶菌发酵胞内多糖对小鼠呼吸道酚红排泌量的影响尝试成果显现,裂褶菌发酵胞内多糖高剂量组、川贝枇杷糖浆组均能增添小鼠呼吸道酚红排泌量,与空缺对比组比拟较,有统计学差别(P<0.05)。标明裂褶菌发酵胞内多糖具备祛痰感化(表1)。
表1 裂褶菌发酵胞内多糖对各组小鼠呼吸道酚红排泌量的影响
组别 | 小鼠数(只) | 剂量 | 酚红浓度(µg/ml) |
空缺对比 | 10 | - | 1.01±0.33 |
阳性药对比 | 10 | 20 | 1.51±0.51 |
高剂量 | 10 | 500 | 1.54±0.62 |
中剂量 | 10 | 250 | 1.36±0.55 |
低剂量 | 10 | 125 | 1.11±0.52 |
3、论断与会商
祛痰的感化道理大多为增添呼吸道排泄,使痰液变稀,或降落痰液中的黏性成份,使痰液黏度降落,或增添呼吸道黏膜上皮细胞纤毛的活动,使痰液易于咳出。酚红祛痰尝试是操纵酚红局部地从呼吸道排泄的特色,在化痰药的感化下,跟着支气管排泄的增添,由呼吸道黏膜排挤的酚红也增添,用beat365中国在线体育 测出酚红的排泌量,从而得悉药物化痰感化的强弱[11]。本尝试操纵酚红作为祛痰成果唆使剂,在川贝枇杷糖浆及裂褶菌发酵胞内多糖的感化下,使呼吸道黏膜排挤的酚红增添,从而证实支气管排泄液增添。本尝试研讨成果显现,裂褶菌发酵胞内多糖高剂量组能增添小鼠呼吸道酚红排泌量,使小鼠呼吸道排泄液较着增添,与空缺对比组比拟较,有统计学差别(P<0.05)。标明裂褶菌发酵胞内多糖具备祛痰感化。本尝试证实了裂褶菌发酵胞内多糖的祛痰药理感化,为临床公道开辟操纵裂褶菌多糖供给了药理学根据,比方祛痰糖浆。同时,为进一步地研讨裂褶菌发酵多糖供给了必然的迷信根据。
4、参考文献
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[4] 邓百万,陈文强,李志洲.裂褶菌养分菌丝卵白质成份的阐发[J].氨基酸和生物资本,2003,25(4):1-2.
[5] 冀颐之,迟文鹤,杜连祥.裂褶菌胞外多糖发酵前提的研讨[J].药物生物手艺,2003,10(1):17-21.
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文章内容来历于:刘伟峰,于浩然,王琦.裂褶菌液体发酵胞内多糖祛痰感化的尝试研讨[J].古代农业科技,2011,9.